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染色体提前凝集标本的制备

实验分类:

细胞实验

别名:

prematurely condensed chromosome,PCC,早熟凝集染色体实验内容信息

最新修订时间:

简介

由于有丝分裂期成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)的活性很高,用 M 期细胞和间期细胞进行融合,可以使间期细胞出现类似于有丝分裂期的形态变化:染色质凝集、核膜崩解、核仁消失等。这种经过诱导而在间期细胞中形成的染色体称为提前凝集染色体或早熟凝集染色体(prematurely condensed chromosome,PCC)。

原理

染色体提前凝集标本的制备原理是将 M 期细胞和 G1 期细胞融合,则 G1 期细胞染色质就凝集为光学显微镜下可见的单股细而长的提前凝集染色体,即 G1-PCC。其染色体的长短和粗细与细胞在 G1 期所处的位置紧密相关:早 G1 期的染色体短而粗,晚 G1 期则细而长。S 期细胞正处于 DNA 复制阶段,大量的复制单位不同时启动复制,所以正在复制的染色质高度解螺旋,光学显微镜下不可见,而只能看到尚未进行复制或复制后又重新凝集的部分。M 期细胞诱导 S 期细胞的染色质凝集呈粉末状或粉碎颗粒状,在电镜下可见:颗粒状是染色质螺旋化程度高的部位,颗粒之间由纤细的染色质丝相连,并且可根据颗粒是单股或双股区分出是复制前还是复制后的染色质,从而断定细胞是处于早 S 期还是晚 S 期。G2-PCC 的形态已接近于 M 期的染色体,只是螺旋化程度较低,所以其染色浅、细长、姐妹染色单体之间紧靠一起。

应用

染色体提前凝集标本常用于细胞周期分析、正常细胞和肿瘤细胞染色体的微细结构的研究、多种因素作用致染色体损伤及修复效应的研究、血液病的诊断及预后等临床实践方面。

来源:丁香实验团队

操作方法

染色体提前凝集标本的制备

由于有丝分裂期成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)的活性很高,用 M 期细胞和间期细胞进行融合,可以使间期细胞出现类似于有丝分裂期的形态变化:染色质凝集、核膜崩解、核仁消失等.这种经过诱导而在间期细胞中形成的染色体称为提前凝集染色体或早熟凝集染色体(prematurely condensed chromosome,PCC)。

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