培养人角膜间质干细胞实验

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

角膜间质细胞，即已知的角膜细胞，表现为静息的表型，以独特的树突状形态为特征，在体内的增殖率非常低下近乎没有。在急性损伤时，角膜细胞开始有丝分裂，呈成纤维细胞形态，迁移至损伤区域。在体外，原代的角膜细胞在无血清或低丝裂原血清培养基中能够维持静止状态，与体内静止的角膜细胞在细胞形态和基质分泌作用方面相似。胎牛血清能够使角膜细胞增殖，但是也能够使角膜细胞变为成纤维细胞或成肌纤维细胞。来源：《人干细胞培养》

来源：丁香实验

操作方法

分离原代人角膜间质细胞

(a)用CMF-SalineG清洗角膜3×5 min。(b)剪除残留的巩膜，结膜和虹膜。(c)加人2ml 1.2U中性蛋白酶II，4℃摇床摇动过夜。(d)将加入中性蛋白酶II的角膜4℃摇30 min。(e)用DMEM/F-12/GASP洗涤角膜。(f)解剖显微镜下，小心去除上皮和内皮细胞。(g)用塑料刮片轻刮基膜的上皮细胞面和内皮细胞面。显微镜下观察，以确保完全去除这些细胞层。(h)用新鲜培养基清