牙髓干细胞 DPSCs 的冻存与复苏

(a)用PBSA洗培养瓶/皿三次。(b)加足够的胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育。(c)在80%的贴壁细胞从培养表面脱离时，加人MSC培养基。(d)500g离心6min。(e)倒掉上清，用冰上预冷的冻存液I重悬细胞。(f)细胞计数，然后稀释或浓缩细胞到终浓度的2倍。继续将装有细胞的试管放置在冰上。(g)在冰上边转动试管边缓慢加人等体积的冻存液II。(h)等量按份加人冻存管。(i)将冻存管放入程控

(a)将冻存管放入37℃水浴，快速溶化（1〜2 min)对最好的复苏效果很重要。(b)加足够体积的MSC培养基，充分混匀。(c)500g离心6 min。(d)倒掉上清，将细胞重悬于MSC培养基中。(e)用台盼蓝染色，进行活细胞计数，然后按需要的细胞密度接种。(f)在MSC培养基，37℃和5% CO2的培养箱中培养