Southern 印迹及基因组 DNA 杂交技术实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

Southern印迹主要用于：基因组DNA的检测分析。

来源：丁香实验

操作方法

Southern 印迹

1. 7~20 μg 基因组 DNA 稀释到 500 μl 合适的限制性缓冲液中。4℃ 过夜。 2. 每管加 10~20 单位限制性酶。孵育 4~6 小时。10 μl 消化液在小琼脂糖凝胶上电泳检测消化的程度。如果需要，就在消化液中补加酶。 3. 用乙醇沉淀消化物：加 50 μl 3 mol/L NaOAc，混匀。然后加 1 ml 100 % 乙醇并混匀，在 -20℃ 至少放 30 分钟；或在

放射性标记的探针与固定化核酸进行杂交

1. 准备适合即将进行的工作的杂交溶液。每平方厘米硝酸纤维素滤膜或尼龙膜大约需要 0.2 ml 预杂交液。预杂交液：用于检测低丰度序列：或者 6x SSC ( 或 6x SSPE) 5 x Denhardt 试剂 0.5% SDS 100 μg/ml 经变性并被打断的鲑精 DNA 或者 6x SSC ( 或 6x SSPE) 5 x Denhardt 试剂 0.5% S