分离核仁实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验来源「细胞实验指南」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

分离核仁

1. 制备溶液： NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl2 0.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl2 2.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl2 0.34 mol/L 蔗糖，0.05 mmol/L MgCl2 0.88 mol/L 蔗糖 2. （可选）用冰冷的 NKM 溶液灌注肝脏。 3. 称组织重量

从人肝脏或胎盘组织中分离核仁

1. 准备溶液： NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L 乙酸镁 2.2 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl2 0.88 mol/L 蔗糖 0.34 mol/L 蔗糖，含 0.5 mmol/L MgCl2 或 0.5 mmol/L 乙酸镁 2. 用大约 200 g 组织，切成小块（2~4 cm2 ) 通过一搅肉机。 3. 用 NK

HeLa细胞细胞核或核仁的制备

1. 准备溶液： PBS RSB-8 10 mmol/L Tris；10 mmoI/L NaCl，8 mmoI/L 乙酸镁，pH 7.4 RSB 10 mmol/L Tris；10 mmol/L NaCl，1.5 mmol/L 乙酸镁，pH 7.2 0.88 mol/L 蔗糖，5.0 mmol/L 乙酸镁 0.34 mol/L 蔗糖，0.5 mmol/L 乙酸镁 0.88 mol/L

高镁法分离核仁

1. 准备溶液 Dulbecco’s 盐溶液： 0.136 mol/L NaCl 2.6 mmol/L KCl 8 mmol/L Na2HPO4 1.4 mmol/L KH2PO4，pH 7.0 蔗糖 A： 0.88 mol/L 蔗糖 12 mmol/L MgCl2 10 mmol/L Tris ( pH 7.5) 蔗糖 B： 0.88 mol/L 蔗糖 1 mmol/L