流式细胞计量术（基于荧光的蛋白质分析）实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验来源「细胞实验指南」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

活细胞表面抗原的荧光染色（直接免疫荧光）

1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，轻摇，收获细胞。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。 2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1% BSA 或热的灭活血清洗细胞。 3. 计数细胞，每个样品的最小浓度为 1X106/ml。 4. 将样品等分为 50 μl 小体积的含 0.1% 叠氮化钠和 1% 热的灭活血清或 1% 的

活细胞表面抗原的荧光染色（间接免疫荧光）

1. 在培养皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，收获细胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化时间长。4℃ 1000 g 离心 5 分钟。操作始终在冰上进行。 2. 用 4 ml PBS+0.1% 叠氮化钠和 1% BSA 或热的灭活血清洗细胞。 3. 计数细胞，每个样品的最小浓度为 1X106/ml。 4. 将样品等分为 50 μl 小体积的含 0.1