凋亡中线粒体功能评价实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验来源「细胞实验指南」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

△ψm的显微分析

1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 储存液，建议活细胞使用浓度 25~40 mol/L，后续将固定的细胞使用浓度为 50~200 mmol/L。为减少假象，荧光染料浓度应尽可能低。 2. 如是贴壁细胞，将细胞在盖玻片上于培养皿中培养 24~48 小时。如是悬浮细胞，200 g 离心 5 分钟沉淀约 5X105 细胞。二者均除去培养基，重置于含有染料探针的预热培养基

△ψm的流式细胞计量术分析

1. 按“△ψm 的显微分析” 用 CMXRos 荧光染料培养约 5X105 细胞。 2. 用 pH 7.2 的 PBS 将细胞洗 2 次，在水平摇床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室温温育细胞沉淀 15 分钟，用以固定。固定细胞在进行流式细胞计量术分析前，可在 4℃ 避光保存 1~10 天。