用10× 浓缩液配制培养基

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

配制全成分培养基时，准备好几个盛有无菌去离子蒸馏水的容器，一个容器的容量至少要够用1~3 周。加浓缩培养基和其他成分，调整pH , 直接使用或放回冰箱。

来源：丁香实验

操作方法

方案11.8 用10× 浓缩液配制培养基（用于密封的培养瓶）

1. 将血清和谷氨酰胺解冻，置于超净工作台内。 2. 所有曾放入水浴锅的瓶子都要擦干净后再放入超净台。 3. 加人上述“无菌溶液”所列成分，加 HEPES 可能会增加缓冲能力，对于某些细胞系，在高细胞密度情况下如果产生很多酸性物质，培养瓶可使其排出。 4. 加人 1 mol/L NaOH ，使 pH 达到 7.2 （20°C ) , 孵育之后培养基的 pH 将上升至 7.4 (37°C )，

方案11.8 用10× 浓缩液配制培养基（用于开式容器于二氧化碳温箱中培养）

1. 将血清和谷氨酰胺解冻，置于超净工作台内。 2. 所有曾放入水浴锅的瓶子都要擦干净后再放人超净台。 3. 加入上述“无菌溶液”所列成分。 4 . 加人 1 mol/L NaOH ，使 pH 达到 7.2 (20°C ) , 孵育之后培养基的 pH 将上升至 7.4 (37°C ) 但如果是第 1 次使用的配方，这个数值可能还需要通过滴定试验来检验。 (a) 在 5 个培养皿中分别加入

方案11.8 用10× 浓缩液配制培养基（用于开放式容器于二氧化碳温箱中培养）

1. 将血清和谷氨酰胺解冻，置于超净工作台内。 2. 所有曾放人水浴锅的瓶子都要擦干净后再放入超净台。 3. 加入上述“无菌溶液”所列成分。 4. 加入1 mol/L NaOH ，使 pH 达到7.2 (20°C)，孵育之后培养基的pH 将上升至7.4 (37°C ) 但如果是第1 次使用的配方，这个数值可能还需要通过滴定试验来检验。