细胞增殖生长方面实验

1. 悬液制备取待测生长状态良好细胞，增长至接近汇合时，向培养瓶内加1 ml 0.25 %胰蛋白酶液，37 ℃温箱中消化，至细胞接近脱离瓶壁前吸出消化液、加新的培养液、轻吹打制备成细悬液、计数； 2. 接种 向每孔中接种等量细胞，置温箱中培养；把培养瓶中营养液倒入试管中并记录下毫升量； 3. 计数检测 从次日起，即开始检测第一组每个孔（或瓶）中的细胞总数，用计算盘或用细胞自动计数器计数，取

计算细胞分裂指数需用向培养瓶中加盖片培养法；每日从瓶中抽出盖片进行固定、染色、制成永久标本，镜下观察分裂相并计数。

一、冻存技术不良或细胞生活力弱时可降低接种存活率为获得确切的接种存活率，接种时一定要接种分散为单细胞悬液。一般情况下把细胞直接接种在碟皿中即可。细胞接种密度和克隆形成率有一定关系。做克隆率测定时，一般持续一周，期间随时检查，到细胞形成克隆时终止培养，固定染色。 1. 细胞 80 %～90 %汇合细胞； 2. 悬液制备 用消化法制备成单细胞悬液，接种到适宜底物（玻璃或塑料瓶皿）；用多孔塑料板

1. 细胞80 %接近合细胞； 2. 悬液制备 用消化法制备成单细胞悬液（细胞数量不少于106）；悬液制备中要仔细，避免产生细胞碎片； 3. 检测 进行流式仪检测。 流式细胞仪除能检测细胞周期时相变化和反应DNA 合成情况外，也可借以了解染色体倍性；另外尚可结合荧光免疫法对细胞膜进行分析等。