原理
细胞分指数是指被测细胞群每1000 个细胞中的分裂细胞数(分裂细胞/1000),用以表示细胞增殖旺盛程度。因此在检测中需观察和记录群体中1000 个细胞中的细胞分裂相数。细胞分裂是细胞增殖的方式,能比较确切地反映细胞增殖度。
细胞分裂在培养的活细胞中也可直接观察到,因细胞分裂是动态变化过程,故分析细胞分裂指数需用固定标本。
材料与仪器
细胞
盖片 显微镜
盖片 显微镜
步骤
计算细胞分裂指数需用向培养瓶中加盖片培养法;每日从瓶中抽出盖片进行固定、染色、制成永久标本,镜下观察分裂相并计数。
注意事项
在计算分裂相时,要注意的是
1. 掌握好确定分裂相标准,其中主要是确定好划分间期和前期、末期和间期等的界限,当两人以上进行观察时更须如此,并始终一致,否则会发生人为误差;
2. 细胞在盖片上的密度常不均匀,细胞高密区与细胞稀疏区细胞分裂相多少可能不同,观察时要选择密度近似区,减少误差;
3. 待取得逐日分裂相数值后,也可绘成细胞分裂指数曲线。
1. 掌握好确定分裂相标准,其中主要是确定好划分间期和前期、末期和间期等的界限,当两人以上进行观察时更须如此,并始终一致,否则会发生人为误差;
2. 细胞在盖片上的密度常不均匀,细胞高密区与细胞稀疏区细胞分裂相多少可能不同,观察时要选择密度近似区,减少误差;
3. 待取得逐日分裂相数值后,也可绘成细胞分裂指数曲线。
注意,细胞分裂指数曲线与生长曲线趋势基本一致,但不完全相同,如当细胞增长达饮饱合密度并进入停止期后,细胞数值很大,而分裂相可完全消失。
来源:丁香实验