初代细胞培养实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

初代培养或原代培养，可以用于：（1）从供体获取组织后的首次培养；（2）组织和细胞刚刚离体，生物性状尚未发生很大的变化，具有二倍体遗传性状，在供体来源充分、生物条件稳定的情况下（年龄、性别），在一定程度上能反映体内状态。

来源：丁香实验

操作方法

消化培养法

1. 准备取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20 分钟； 2. 布局点燃酒精灯（或煤气灯），安装吸管帽（应通过火焰）； 3. 处理组织把组织块置入烧杯中，用Hanks液漂洗2~3 次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60 分钟； 4. 剪切用眼科剪把组织块切成2~3 毫米大小的块（用手术刀割亦可），以便于消化；加入比组织块总量多30~50

组织块培养法

1. 剪切把组织小块（1cm3）置入小烧杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸净Hanks液，用眼科剪反复剪切成1mm3块为止； 2. 摆布用弯头吸管吸取若干小块，置入培养瓶中；用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底上，小块相互距离以0.5 cm 为宜，每一25 ml培养瓶底可摆布20~30 块； 3. 轻轻翻转培养瓶，令瓶底向上；注意翻瓶时勿令组织小块流动，塞好瓶塞，置36