初代组织块培养法
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1. 剪切:把组织小块置于小烧杯或青霉素小瓶中,用 Hanks 液漂洗二三次以去掉表面血污,吸静 Hanks 液,用眼科剪反复剪切 1mm3 块为止。
2. 摆布:用弯头吸管吸取若干小块,置于培养瓶中,用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底部,小块相互距离以 0.5cm 为宜,每一 25ml 培养瓶底可摆布 20~30 块。
3. 轻轻翻转培养瓶,另瓶底向上,注意翻瓶时勿另组织小块流动,塞好瓶塞,置 36.5 ℃温箱培养 2 小时左右(勿超过 4 小时),使小块微干涸。
4. 培养:从微箱中取出培养瓶,开塞, 46 度斜持培养瓶,箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶地上的组织小块。置温箱中静止培养。待细胞从组织块游出数量增多后。再补加培养液。