细胞表面标记的检测技术

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

淋巴细胞表面标记主要包括表面受体和表面抗原，淋巴细胞表面标记的检测已广泛用于基础、临床免疫学研究和患者免疫功能的测定。检测方法主要应用同位素、酶和荧光素及其它标记技术。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990）

来源：丁香实验

操作方法

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶（APAAP）免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记

1. 分离外周血单个核细胞（PBMC），洗涤后用含10 ％FCS PMI1640调整细胞浓度约5×106 /ml 　　　　 2. 自制制片机上制片，充分干燥　　　　　　　　 3. 用含丙酮-福尔马林固定液中固定30 秒钟　　　　　　　　　　　　　　　 4. 自来水、蒸馏水依次冲洗　　　　　　　　　　　　　　　 5. 用TBS稀释特异性McAb或阴性对照抗体（1∶

活细胞免疫荧光技术－流式细胞仪标本的制备

1. 制备活性高的细胞悬液（培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法）　　　　　　　　　　　　　　　　 2. 用10 ％FCS RPMI1640调整细胞浓度为5×106～1×107 /ml 　　　　　　　　 3. 取40 μl细胞悬液加入预先有特异性McAb（5～50 μl）的小玻璃管或塑料离心管，再加50 μl 1∶20（用DPBS稀释）灭活正常兔血清，4 ℃