大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

大鼠大脑皮层神经元细胞培养可用于：（1）获得大鼠大脑皮层神经元细胞；（2）神经元细胞定向分化研究；（3）神经元细胞凋亡研究

来源：丁香实验

操作方法

机械性划割培养

一、实验步骤 1. 孕16 d SD 大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜，无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks’平衡盐液中。 2. 在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层，除去脑膜，剪碎组织成约1mm3 大小，加入胰酶-EDTA 消化液并放入 37℃孵箱内消化20 min，中间摇晃一次。 3. 随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的培养液(D

酶消化法

一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤 1. 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min，解剖出完整鼠脑。 2. 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗，用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。 3. 移入培养皿中，吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2 ml，37℃培养箱中消化30 min。 4. 将皮层组织碎块移入离心管，弃去剩余消化液，用接种液洗3次，每次洗涤后使组织