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重组杆状病毒的纯化实验

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

简介

杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,可用于(1)作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率(2)作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白(3)研究杆状病毒基因组的结构与功能(4)研究真核基因表达的调控机制。

来源:丁香实验

操作方法

编码β-半乳糖苷酶

1. 制备病毒上清的系列稀释液,该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360 β-gal DNA的细胞。在含150 ug/ml X-gal的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2. 当蚀斑形成后,用灭菌巴斯德吸管挑取一个分离较好的蓝色蚀斑,并将琼脂糖块移入 一支含有1 ml 无血清完全培养液的无菌试管中。在旋涡混合器上剧烈篱荡,并用无血清完全培养液制备10-1、10-2和10-3的系列

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