丁香实验_LOGO丁香通
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
收藏
wx-share
分享

GST-pulldown 操作流程

实验分类:

实验仪器使用

最新修订时间:

简介

利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合,已广泛应用于分子生物学(1)证实两种蛋白可能有相互作用(2)寻找能与已知蛋白发生相互作用的未知蛋白。

来源:丁香实验

操作方法

GST-pulldown操作流程  

细胞蛋白裂解液,洗脱液:PBS及PBS+1%Triton-100PBS (1L)NaCl: 8gKCl: 0.2gNa2HPO4: 1.44gKH2PO4: 0.24g加入800ml蒸馏水,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可,高温高压灭菌,4℃保存备用。PMSF(苯甲基磺酰氟) MW:174.19 工作浓度0.1-1mM,这里使用1mM,储存浓度100

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序