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简介
利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合,已广泛应用于分子生物学(1)证实两种蛋白可能有相互作用(2)寻找能与已知蛋白发生相互作用的未知蛋白。
来源:丁香实验
操作方法
细胞蛋白裂解液,洗脱液:PBS及PBS+1%Triton-100PBS (1L)NaCl: 8gKCl: 0.2gNa2HPO4: 1.44gKH2PO4: 0.24g加入800ml蒸馏水,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可,高温高压灭菌,4℃保存备用。PMSF(苯甲基磺酰氟) MW:174.19 工作浓度0.1-1mM,这里使用1mM,储存浓度100
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