二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定实验

实验分类：

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

NADH：硫辛酰胺氧化还原酶，硫辛酰胺脱氢酶。

此酶发现于细胞中，游离形式（二聚体）存在，与多酶复合体结合，与丙酮酸脱氢酶复合体、酮戊二酸脱氢酶复合体以及分支的含氧酸脱氢酶复合体相似。

此酶首先被 Straub（1939）发现，由于其在加入人为的电子受体如氰化铁、二氯酚吲哚酚和醌后，可以催化 NAD（P）H 的氧化，由此得名。

来源：《酶学实验手册》

来源：丁香实验

操作方法

二氢硫辛酰胺的氧化反应

实验所需「试剂」具体见「其他」0.96 ml 实验混合物0.02 ml 0.2 mol/L DL-二氢硫辛酰胺 4.0 mol/L0.02 ml 酶样品开始加入 0.01 ml 0.1 mmol/L H2O2 溶液30℃ 时，于 340 nm 处吸收值发生变化，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。

硫辛酰胺的还原反应

0.93 ml 实验混合物0.05 ml 0.2 mol/L DL－二氢硫辛酰胺 10 mol/L0.02 ml 酶样品30 ℃ 时，于 340 nm 处吸收值发生变化，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。