通过重组杆状病毒安全、高容量地把基因转运进昆虫和脊椎动物细胞

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

杆状病毒已经成为在真核细胞中表达重组蛋白质的标准工具。数千种胞内和分泌的蛋白质已经在昆虫细胞中成功表达。改造过的杆状病毒能够转导分裂的和不分裂的脊椎动物细胞，从而进一步扩大了杆状病毒表达载体系统（BEVS) 的应用范围。这就为通用的表达方法提供了基础，能通过一步克隆允许目的基因在一些不同类型的宿主中表达。最近的发现证明杆状病毒能可以在哺乳动物中介导有效地基因递送。因为作为非哺乳类病毒，这类病毒无法在脊椎动物细胞中复制和表达病毒基因，所以，杆状病毒有成为有效的基因治疗载体的潜力。
作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

来源：丁香实验

操作方法

用 BVboost 系统制备重组杆状病毒

用 BVboost 系统制备重组杆状病毒材料试剂 B a c t o 琼脂 Bluo-gal/X-gal (可选择） B o o s t 溶液 1 10m m o l / L Tris-HCl (p H 8. 0) 10m m o l / L E D T A l 〇〇/xg/6m l R N a s e A

重组杆状病毒转导脊椎动物细胞

重组杆状病毒转导脊椎动物细胞材料杆状病毒（浓缩的高滴度的储备病毒）细胞（如人肝细胞系；H e p G 2 > ，指数生长期细胞细胞培养液（完全捧养液，无血清培养液和选择培养液 ) D ulb ecco 磷酸盐缓冲液（P B S )