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简介
细胞周期的动态信息可以通过标记 5'-BrdUrd 获得,BrdUrd 可以掺入到 DNA 的胸腺嘧啶位点上。检测 DNA 中的 BrdUrd 就可以计数 S 期的细胞,如果在不同时间间隔采集标本,就可以获得细胞周期动力学的信息。
原理
非同步化细胞群体的细胞周期分析的基本原理将细胞持续孵育在溴脱氧尿苷(BrdUrd)溶液中,在合成 DNA 的过程中,BrdUrd 可以掺入到细胞中。在 DNA 合成这间隔中,收获细胞,细胞核用双苯并咪唑,(Hoechst 33258)以及碘化物(PI)染色。在流式细胞仪上,这些染料可以被紫外光激发,从而发射蓝色和红色荧光。Br-dUrd 可以淬灭 Hoechst 染料的蓝色荧光。淬灭的程度记录了细胞经历 S 期的过程(s);红色荧光(PI)存在于整个细胞分裂周期,通过这种方式,可以跟踪细胞周期的整个过程。
来源:丁香实验团队
操作方法
细胞周期的动态信息可以通过标记 5'-BrdUrd 获得,BrdUrd 可以掺入到 DNA 的胸腺嘧啶位点上。检测 DNA 中的 BrdUrd 就可以计数 S 期的细胞,如果在不同时间间隔采集标本,就可以获得细胞周期动力学的信息。