HIV 的检测与分析

外 周 血 中 H IV 的 分 离 和 定 量 检 测 基 本 方 案 1 外 周 血 中 H IV 的培养以及通过 TCID 定量来测定其滴度 注 ：所有的培养都在 37°C ，含 5 % 0 3 2 的加湿培养箱中进行。 材 料（带 V 项 目 见 附 录 1) 来 自 正 常 个 体（H I V -血清反应阴性）及 感 染 个 体（H I V -血清反应阳性）的全血

感 染 CD4+ 原 代 细 胞 系 及 H I V 的诱导 基本方案1 用 H IV 体 外 急 性 感 染CD4 + 原代细胞及细胞系表 9.2.1列出了一些最常用于体外H I V 感 染 的 C D 4 + 靶细胞。用其他不同谱系的C D 4 + 细胞系也可获得相应的结果，还 有 一 些 C D f 细胞在一定的实验条件下也可被感染。 材 料 CD4

基 本 方 案 单 核 细 胞 来 源 的 巨 噬 细 胞 培 养 和 H IV 感染 药物或生长因子的加入时间依试剂及实验方案而定，单核细胞通常在分离的当天加入 ，成熟的单核细胞来源的巨卩蜜细胞（monocyte-derived macrophages， M D M ) 则在H I V 感染前、感染时或感染后加入。 材 料 ​

基 本 方 案 1 免 疫 印迹 法 检测 H IV 蛋白 本方案用蛋白质提取法定量测定细胞样品中病毒蛋白的含量。用 抗 H I V -血清及 125I标记的葡萄球菌蛋白 A 来进行检测。也 可 以 用 酶 联 二 抗（生 物 素 化 的 抗 人 I g G 抗体）和适当的颜色指示剂（亲和素-过氧化物酶耦合物及化学发光底物）进行检测以避免使用同位素。任 何 细 胞（包括