识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

抗磷酸肽的抗体可以识别仅处于磷酸化状态的蛋白质。该抗体不与同种的未磷酸化蛋白质或其他磷酸蛋白质发生交叉反应。由于蛋白质的磷酸化状态通常反映一种蛋白质的功能状态或活性，因此利用此种抗体是检测蛋白质功能状态的便捷手段。

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

来源：丁香实验

操作方法

识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备

基本方案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料 B S A -琼脂糖亲和基质（Sigma) 填装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3) 磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清 PB S /叠氮钠.•含有0.02% (m /V ) 叠氮钠的 PBS