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简介
IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。
来源:丁香实验
操作方法
一、IL-8的诱生 1. 常规分离PBMC,洗涤后,调细胞浓度为5×106/ml。 2. 将细胞接种于24孔细胞培养板,每孔0.5 ml。 3. 加诱生剂LPS(20 ug/ml),每孔0.5 ml,37度,5%CO2孵育48 h。 4. 离心收集细胞培养上清液,用HCl溶液调为酸性(pH4.0),经SephadxG-75柱分离,收集活性组分即为待测的IL-8粗