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抗体产生细胞的检测—溶血空斑实验

实验分类:

免疫学实验

最新修订时间:

简介

取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏,制成脾细胞悬液,与一定量的指示细胞(绵羊细胞)和补体结合,注入自制的小室内,经37℃孵育后,单个散在的抗体形成释放抗体,抗体与周围的绵羊红细胞(抗原)结合,并在补体参与下,使绵羊细胞溶解,结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可见的圆形透明溶血区—溶血空斑。

来源:丁香实验

操作方法

抗体产生细胞的检测

1. 免疫动物 取25%绵羊红细胞悬液1毫升,无菌操作注入小鼠腹腔中。 2. 脾细胞液的制备 (1)小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1~2次。 (2)取出脾脏研钵中研碎,加Hanks液2~3毫升,用吸管反复吹打数次,使细胞分散。将此细胞悬液经4~8层纱布过滤,1500转/分离心5分钟,弃上清。 如细胞太多,可加蒸馏

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