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简介
原理
来源:蛋白质的定性定量分析技术-《医学分子生物学实验技术》药立波第四版
操作方法
蛋白质的电泳染色分析是用电泳技术将混合液中不同的蛋白质分离开,通过蛋白质染色明确某种蛋白质的相对含量的技术。电泳分离血浆蛋白,染色并计算清蛋白和球蛋白的比例是此法的最早应用。原理电泳染色分析测定细胞可溶性蛋白质含量的基本原理是电泳技术将混合液中不同的蛋白质分离开,通过蛋白质染色明确某种蛋白质的相对含量得到这种蛋白质在总蛋白中所占比例。蛋白质染色方法包括考马斯亮蓝 R-250 染色法、银染色法(si
免疫印迹法分析测定细胞可溶性蛋白质含量免疫印迹法(immunoblotting)是对蛋白质混合溶液中目的蛋白进行定性的方法,也是对目的蛋白在不同细胞或者同一种细胞不同条件下的相对含量进行半定量的方法。印迹技术最初用于核酸分子检测,后来人们发现蛋白质在电泳分离之后也可以转移并固定于膜上,因此该方法也用于蛋白质的定性定量分析。相对应于分析 DNA 的 Southern 印迹和分析 RNA 的 Northern 印迹(见第六章),蛋白质印迹
流式细胞术分析测定细胞可溶性蛋白质含量流式细胞术(flowcytometry assay,flow cytometry,FCM)是一种定量分析技术,是指利用流式细胞仪检测细胞内特异标记的荧光信号,从而测定细胞的多种生化物质(如膜蛋白、抗原、离子或 DNA/RNA 水平等)性质的方法,同时也是一项可以把具有相同荧光信号特征的某些细胞亚群从多细胞群体分离出来的细胞分析技术。