用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验

①去掉培养基，并用冷PBS洗细胞2次。②把培养瓶置于冰上。③100mm的培养瓶（预冷至4℃)中加入10ml裂解缓冲液，裂解缓冲液的体积应根据培养瓶的大小来调整。④冰上孵育细胞10〜30min(取决于所孵育的细胞系），并不时地摇动瓶子。⑤在冰上倾斜瓶子，使缓冲液流向一边，用吸管将裂解液转移到一个微量离心管或其他合适的离心管中。其他培养瓶均如此操作。有些研究者喜欢把细胞从培养瓶中刮下来，但这可能产生细

①细胞在480g的离心力条件下离心10min，弃去上清。②用冷PBS洗细胞两次，然后将洗过的细胞置于冰上。③重新悬浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷却到4℃)中含大约1X107〜5X107个细胞。④冰上孵育细胞15min，并不时地振动小管。⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min。⑥小心地把上清移到另一个小管中，应确保不要碰到沉淀物。将裂解液置于冰上，以备免疫沉淀所用。细胞裂解液可以使用干冰和乙醇