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​方法B:悬浮生长的细胞的裂解

相关实验:用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验

最新修订时间:

材料与仪器

细胞

步骤

①细胞在480g的离心力条件下离心10min,弃去上清。


②用冷PBS洗细胞两次,然后将洗过的细胞置于冰上。


③重新悬浮沉淀,使1.0ml裂解液(冷却到4℃)中含大约1X107〜5X107个细胞。


④冰上孵育细胞15min,并不时地振动小管。


⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min。


⑥小心地把上清移到另一个小管中,应确保不要碰到沉淀物。将裂解液置于冰上,以备免疫沉淀所用。细胞裂解液可以使用干冰和乙醇的混合物迅速冰冻,-70℃条件下可以长期储存。但是,通过免疫沉淀分离的蛋白复合物的分析,建议使用新制备的细胞裂解液。

常见问题


来源:丁香实验

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