染料配基层析法纯化蛋白质实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

染料配基层析不是真正意义的亲和层析，因为它们并不是与它们结合的蛋白质的天然配基。然而染料柱能很好地结合蛋白质，并能导致满意地纯化蛋白质。事实上，有时这种结合甚至比正常的配基更紧。染料配基柱通常是廉价和稳定的，并且具有较高的蛋白质结合容量。所以染料配基层析能作为蛋白质纯化中有价值的步骤之一。

来源：《蛋白质技术手册》

来源：丁香实验

操作方法

染料配基法

在开始染料配基层析纯化蛋白质之前，必须确定所用的染料。如前所述，需用不同染料柱进行小规模（1 ml 柱）试验筛选。Scopes 推荐的策略可供参考。此外，进一步的小规模试验可用于优化洗脱参数。有必要提醒注意的是：一个能与许多蛋白质结合而不结合目的蛋白的染料配基柱非常有用。它可以作为最终纯化前去除杂蛋白的极佳步骤。以下介绍 Cibacron Blue F3GA 柱用高盐溶液洗脫的方案。1. 用5 m