染料法绝对定量，为什么扩增曲线和熔解曲线都有，但是测不出Cq值

这个扩增曲线就有问题，8-9个循环就到平台期了，曲线也不光滑，看看是不是模板浓度的问题，还有你的酶用对没

你拖一下设阈值的那条线看看会不会有，一般扩增曲线是s型的，你这个起峰有点早啊

反应循环数不够、测荧光信号的步骤有误、引物或探针降解、引物或探针的设计 如探针高于引物的温度不够，造成探针未杂交上而产物已延伸的情况。、模板量不足、模板降解。等都有可能。

可能是探针高于引物的温度不够，造成探针未杂交上而产物已延伸的情况。