M13 噬菌体衣壳蛋白改造在改良噬菌体展示技术中的应用实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本章描述了改进融合蛋白在 M13 噬菌体颗粒表面展示水平的一个方法。向 M13 衣壳锚定蛋白引入突变后，蛋白质展示水平约能增加两个数量级。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。

来源：丁香实验

操作方法

M13 噬菌体衣壳蛋白改造在改良噬菌体展示技术中的应用

下述方法描述了 P8 库的设计（见 12.3.1)、构建（见 12.3.2 )、选择（见 12.3.3.1 ) 和筛选（见 12.3.3.2)，依此来鉴定能改进蛋白质表达水平的突变体。我们描述了利用前述噬菌粒—— pS1607 改进 hGH 表达水平的方案。这一方法也适用于任何其他靶蛋白。唯一的改变就是用表达靶蛋白的噬菌体粒取代 pS1607 以及用高亲和性的靶蛋白配体取代 hGH 结合蛋白。