实验分类:蛋白质实验
最新修订时间:2022-02-10
简介
来源:丁香实验
操作方法
3.1 克隆 NExT 混编过程中,使用包含限制性酶切位点的混编引物的配对位点应设置在紧挨着目标基因的两侧,理想的退火温度为 60°C 左右。通过 4 加 2 法则估算引物的退火温度:每个 G 碱基和 C 碱基为 4°C,A 碱基和 T 碱基为 2°C。 我们在 NEXT 混编过程中使用的基因包括:含 657 个碱基的野生型 CAT 基因 ( CATwt;SwissProt 编号: P00 4
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