琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

乳酸脱氢酶存在于一切有糖酵解作用的细胞中, 在NAD⁺存在下催化乳酸脱氢形成丙酮酸或使丙酮酸还原成乳酸。本实验目的是掌握用琼脂糖凝胶电泳分离LDH 的原理和方法，学习定量测定动物血清中LDH 的各同工酶的相对百分含量。

来源：丁香实验

操作方法

电泳分离法

1 . 凝胶板的制作: 将电泳洗净、干燥, 两边用胶带封口,选好梳子并装好, 调节水平, 浇已熔化好的0 . 7%琼脂糖凝胶适量, 冷至凝固, 然后移至4 ℃冰箱中放置30～50 min 后使用。 2 . 点样及电泳: 将电泳缓冲液加到槽中刚好盖上凝胶, 用微量取样器加20 μl 血清样品(样品中或加入溴酚蓝指示剂) , 按4～5 mA/ cm 胶宽调节电流, 电泳大约40～50 mi