核酶实验

RNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

核酶（ribozyme ) 是一类具有酶特性的 RNA 分子，通过催化靶位点 RNA 链中磷酸二酯键的断裂，特异性地剪切底物 RNA 分子，从而阻断基因的表达。核酶广泛存在于从低等到高等的多种生物中，参细胞内 RNA 及其前体的加工和成熟过程。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。

来源：丁香实验

操作方法

锤头型核酶实验

一、材料与设备所有试剂及容器需绐去 RNase 处理。 1. 主要设备：低温高速离心机、聚丙烯酰胺电泳装置、放射自显影用具、水浴等。 2. CMCT，I-cyclohexyI-( 2-morphohnoethyI) carbodiimide metho-p-tohicne sulfon- ate ( Sigma，St. Louis，MO )。 3. 缓冲液 A：14 mmol/L Tri

发夹型核酶实验

一、材料与设备 1. 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置。 2. 放射自显影用具。 3. 水浴。 4. 终止缓冲液：90% 去离子甲酰胺，0.02% 溴酚蓝，15 mmol/L EDTA，50 mmmol/L HEPES-NaOH (pH 7.5)，0.1 mmol/L EDTA，12 mmol/L MgCl2。二、操作方法 1. 发夹型核酶的结构发夹型核酶剪切与连接活性的基本结构是核酶中区

其他类型的核酶

一、材料与设备 1. 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置。 2. 放射自显影用具。 3. 水浴。 4. 上样缓冲液：95% 去离子甲酰胺，0.05% 溴酚蓝，0.05% 二甲苯青。 5. RNase T1、RNase U2 ( Amersham Pharmacia 公司）。 6. 终止缓冲液：95％去离子甲酰胺，0.05% 溴酚蓝，0.05% 二甲苯青，10 mmol/L EDTA。二、操