L-DNA标记的等位基因特异性PCR
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简介
L-DNA 标记的等位基因特异性 PCR，是将等位基因特异性 PCR 与 L-DNA 标记的 PCR 结合起来。L-DNA 标记的 PCR 扩增的 DNA 是带有序列确定的 L-DNA 标签。L-DNA 是自然存在的 D-DNA 的对映体，由 L-2' 脱氧核昔酸组成。单链 L-DNA 能够与 L-DNA 互补，但不与 D-DNA 互补，由于大分子的手性，自然界的酶如核酸酶、聚合酶也不能对 L-DNA 起作用。因为 Taq DNA 聚合酶在 L-DNA 模板尚不能合成，PCR 反应之后，L-DNA 标记的引物产生的 PCR 产物带有 L-DNA 黏末端，通过表面等离子共振（surface plasmon resonance，SPR）成像分析进行 SNP 分型，适用于高通量筛选。目前，用于 L-DNA 标记的等位基因特异性 PCR 的方法主要有 1 种：L-DNA 标记的等位基因特异性 PCR。
原理
L-DNA 标记的等位基因特异性 PCR 的基本原理同等位基因特异性 PCR 相同，两条上游引物，分别在 3' 端含有不同的等位基因，和一条共同的下游引物。所不同的是两条上游引物的 5' 端含有不同的 L-DNA 序列。在图 14-5 中，引物中 5' 端不同的阴影表示不同的 L-DNA 序列，黑色部分代表与靶序列配对的 DNA， 这些引物与不同的模板反应，例如野生型纯合子（WT homozygote）、杂合子（heterozygote）、突变型纯合子 （MU homozygote），会得到不同数量的含 有不同 L-DNA 的 PCR 产物，通过与 SPR 芯片上的互补 L-DNA 序列结合，便可检测到不同的 PCR 产物。
来源：丁香实验团队
操作方法
L-DNA 标记的等位基因特异性 PCR，是将等位基因特异性 PCR 与 L-DNA 标记的 PCR 结合起来。L-DNA 标记的 PCR 扩增的 DNA 是带有序列确定的 L-DNA 标签。L-DNA 是自然存在的 D-DNA 的对映体，由 L-2' 脱氧核昔酸组成。单链 L-DNA 能够与 L-DNA 互补，但不与 D-DNA 互补，由于大分子的手性，自然界的酶如核酸酶、聚合酶也不能对 L-D
