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简介
序列特异性寡核苷酸多态性 PCR,英文名是 PCR-sequence specific oligonucleotide polymorphism, PCR-SSOP。PCR-SSOP 常用于对人类白细胞抗原的 A、B、DR 进行分型,当患者需要进行骨髓或器官移植时,首先必须进行组织配型工作。如果捐受双方的遗传基因型相符合,那么受者发生「排斥反应」的概率减小,移植成功率也相对的提高。否则当双方的遗传基因型不相同时,受者的免疫系统就会把捐者所提供的骨髓或器官当作病菌进行攻击,最终导致移植失败。因此捐受双方的基因检验的准确度是首要关键。
目前,用于序列特异性寡核苷酸多态性 PCR 的方法主要有 1 种:序列特异性寡核苷酸多态性 PCR。
原理
序列特异性寡核苷酸多态性 PCR 的基本原理:
由于生物种类具有多样性,每一个基因在同一座位上具有多种等位基因。因此可以根据在同一基因上存在的差别将某一生物分为不同的类型,进而在功能上对它们加以区分。序列特异性寡核苷酸多态性 PCR 包括设计通用引物,在不同样品中扩增等位基因;然后,使用多个探针 (同位素标记或生物素等标记) 在特定的条件下进行杂交,探针是针对每一个类型的基因 (同一簇等位基因) 设计的;经过显色或曝光,利用人工或电脑软件判读实验结果。
应用
序列特异性寡核苷酸多态性 PCR 的常用应用领域如下:
(一)主要组织相容性抗原的分型。
(二)检测不同样品间的组织特异性,鉴别分类,并确定亲缘关系。
(三)基因检验,查找病因,提供精确配型。
来源:丁香实验团队
操作方法
序列特异性寡核苷酸多态性 PCR,英文名是 PCR-sequence specific oligonucleotide polymorphism, PCR-SSOP,是可以采用一对引物扩增所有 HLA-A2 特异性抗原,用 23 个探针和扩增产物杂交,探针用地高辛系统标记和检测,可以鉴定 A2 的 25 个等位基因,并在中国人群 HLA-AO2 等位基因的检测中进行应用,用 B 淋巴母细胞株作为阴
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