用经典 RACE 扩增 cDNA 的5’末端实验

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

这一实验方案分为 3 个阶段。第 1 阶段：反转录产生 cDNA 模板；第 2 阶段：在第一链 cDNA 产物末端加 poly(A) 尾；第 3 阶段：扩增。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

用经典 RACE 扩增 cDNA 的5’末端实验

第 1 阶段：反转录产生 cDNA 模板一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 dNTP 溶液（含 4 种 dNTP，各 10mmol/L) DTT(0.lmt)l/L) TE(10mmol/LTris-HCl、pH7.5,1 mmol/LEDTA、pH8.0) 2. 酶和缓冲液反转录缓冲液，5X(制造商提供） RNA 酶 H RNasin SuperScriptII 逆转录酶