差异表达 cDNA 的重新扩增、克隆与测序实验

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

从丙烯酰胺凝胶上切下潜在的差异表达 cDNA 之后，用同一种锚定-任意引物组合重新扩增 cDNA, 反应条件与最初 PCR 相同。重新扩增的产物，可以进行克隆和测序，以供进一步分析。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

差异表达 cDNA 的重新扩增、克隆与测序实验

一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 1.5% 琼脂糖凝胶，加溴化乙锭 (见第 9 步）蒸馏水 DNA 点样染料 30% 甘油 70% 蒸馏水 0.003% 溴酚蓝 0.003% 二甲苯腈 FF(GenHunterS403) 溴化乙锭溶液（0.5ug/ml) 蒸馏水重新扩增混合液（见第 7 步） 2. 核酸和寡核苷酸任意引物（H-AP)(2 mmol/L) cDNA