直接原位 PCR

一、组织切片和细胞样品的制备 1. 试剂与配置 10%福尔马林；二甲苯；PBS。 2. 操作方法 （1）用10%福尔马林固定组织8~15 h，石蜡包埋，切片（4 um），将切片置于新鲜的二甲苯中处理5 min，放入无水乙醇中浸泡5 min，取出，空气干燥； （2） 对于培养细胞，可直接制备爬片，也可有PBS洗细胞一次，加10%福尔马林静置过夜，用橡胶刮下细胞；用PBS洗细胞两次，2 0

短串联重复序列 PCR，由于 STR-PCR 基因座仅需少量模板 DNA, 灵敏度比传统的 DNA 指纹高很多，而且 STR-PCR 扩增片段长度较 短，一般为 100〜400bp，对于法医常遇到的仅含降解 DNA 的陈旧性斑痕，STR-PCR 比传统的 DNA 指纹灵敏度和准确度更高。因此，STR 分型被认为是第二代法医 DNA 指纹技术的核心, 是目前国内外法医学个体识别和亲权鉴定的主要技术发

一、试剂配制（1）4％ 多聚甲醛固定液，2% AES 溶液；（2）蛋白酶 K：储存液-用灭菌水溶解蛋白酶 K 粉末至 1mg/mL，-20 °C 贮存；工作液-现用现配，使用 PBS 稀释 150 倍；（3）PCR 缓冲液（10x）500 mmol／L KC1,100 mmol／L Tris-HCl（pH 8.4）， 15 mmol/L MgCl2，0.5% Tween20，1 mg/L BSA；