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简介
本实验介绍痘苗病毒感染细胞的方法和质粒转移载体转染感染后的细胞产生重组病毒的方法。
内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》
来源:丁香实验
操作方法
1. 将目的基因亚克隆到 pSC11、pRB21、pSC65、pLW9 或其他合适载体的多克隆位点(MCS)上,分离质粒。2. 将 1 × 106 的 CV-1、BS-C-1,BHK-21 或 CEF 细胞用完全 MEM-10 培养基接种到 25 cm2 组织培养瓶中,培养至接近单层生长至汇片的程度(通常过夜)。3. 使用前,将等体积的痘苗病毒储液与 0.25 mg/ml 胰酶混合,涡旋混匀。在
DOTAP 法1. 将目的基因亚克隆到 pSC11、pRB21、pSC65、pLW9 或其他合适载体的多克隆位点(MCS)上,分离质粒。2. 将 1 × 106 的 CV-1、BS-C-1,BHK-21 或 CEF 细胞用完全 MEM-10 培养基接种到 25 cm2 组织培养瓶中,培养至接近单层生长至汇片的程度(通常过夜)。3. 使用前,将等体积的痘苗病毒储液与 0.25 mg/ml 胰酶混合,涡旋混匀。在