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随机引物法标记 DNA

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

利用寡核苷酸作引物,DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成(Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一,它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸(5' 端的核苷酸除外)的互补物将以同样的频率掺入产物。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

随机引物法(利用寡核苷酸延伸法标记DNA放射性)

一、材料 1. 缓冲液和溶液 醋酸氨(10 mol/L) 乙醇 NA 终止/贮存缓冲液(50 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5),50 mmol/L NaCl,5 mmol/L EDTA (pH 8.0),0.5% (m/V) SDS) 5X 随机引物缓冲液(250 mmol/L Tris (pH 8.0),25 mmol/L MgCl2,100 mmol/L NaCl,10

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