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脉冲场凝胶电泳制备 DNA(哺乳动物细胞和组织DNA的分离)

实验分类:

DNA 实验

最新修订时间:

简介

本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要,DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明:从胞核制备 DNA 没有优点,因为从完整细胞制备的 DNA 同样易于酶切。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源:丁香实验

操作方法

脉冲场凝胶电泳制备DNA(哺乳动物细胞和组织DNA的分离)

一、材料 1. 缓冲液和溶液 EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.0) L 缓冲液(0.1 mol/L EDTA (pH 8.0),0.01 mol/L Tris-Cl(pH 7.6),0.02 mol/L NaCl,4℃ 贮存) 含蛋白酶 K 和十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl) 的 L缓冲液 磷酸缓冲盐液(PBS) 红细胞裂解缓冲液(155 mmol/L NH4CI,0

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