脉冲场凝胶电泳制备 DNA（哺乳动物细胞和组织DNA的分离）

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案叙述了从培养细胞和组织制备 DNA 样品的方法。病人或动物来源的白细胞也能用作 PFGE 的高分子质量 DNA 样品。如果确有必要，DNA 也可以从哺乳动物细胞分离出的胞核制备。经验表明：从胞核制备 DNA 没有优点，因为从完整细胞制备的 DNA 同样易于酶切。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

脉冲场凝胶电泳制备DNA（哺乳动物细胞和组织DNA的分离）

一、材料 1. 缓冲液和溶液 EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.0) L 缓冲液（0.1 mol/L EDTA (pH 8.0)，0.01 mol/L Tris-Cl（pH 7.6)，0.02 mol/L NaCl，4℃ 贮存）含蛋白酶 K 和十二烷基肌氨酸钠（Sarkosyl) 的 L缓冲液磷酸缓冲盐液（PBS) 红细胞裂解缓冲液（155 mmol/L NH4CI，0