琼脂板上裂解性感染实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

λ噬菌体重组体编码的融合蛋白可通过大肠杆菌株 Y1089 溶源化菌落来制备。但从大量单个噬菌斑制备溶源菌工作量大，且并不一定每次成功（Huynh et al.1985)。另外，裂解性噬菌体感染可通过软琼脂（本方案）或液体培养（方案 9) 获得。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

琼脂板上裂解性感染实验

材料缓冲液及溶液关于贮存液，缓冲液，试剂组分见附录 I。用前稀释贮存液至合适浓度。对照覆盖溶液（每个分析的重组噬斑需 6 ml) 10 mmol/LMgSO4 0.5X LB 培养液 LB 配方见附录 2，高压灭菌后加入 1mol/LMgSO4 使终浓度为 10 mmol/L, 每个 150 mm 琼脂板需 6 ml 本溶液 IPTG 覆盖溶液（每个分析重组噬斑需 12 ml)