质粒 DNA 提取实验

实验分类：

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

质粒DNA提取可以：（1）快速纯化质粒；（2）用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。

来源：丁香实验

操作方法

碱解法

一、材料与试剂准备1. 材料：大肠杆菌。2. 仪器：超净工作台，培养箱，摇床，恒温水浴锅，台式离心机，取液器一套，低温冰箱，冷冻真空干燥机，电泳仪，水平电泳槽，紫外观测仪。3. 试剂：（1）Solution I ：25 mM Tris-Hcl（pH7.4），10 mM EDTA（pH8.0），50 mM葡萄糖，高压灭菌，4℃保存。（2）Solution II ：0.2 M NaOH， 1%SDS

SDS碱裂解法（试剂盒提取）

一、试剂盒组成、贮存、稳定性耗材：DNA 制备管，2 ml 离心管，1.5 ml 离心管。 RNase A：50 mg/ml，室温保存。 Buffer S1：细菌悬浮液。加入RNase A 后，4℃ 贮存。 Buffer S2：细菌裂解液，室温密闭贮存。(若出现沉淀，应于37℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。） Buffer S3：中和液，室温密闭贮存。 Buffer W1：洗涤液