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人工细菌染色体（bacterial artificial chromosomes，BAC）是可以克隆外源大片段 DNA 的载体系统。主要由 redF（F 因子基因）和 Ori2 序构成的复制子以及其他调控序列组成。BAC 复制受到严格的控制，因此在 Ecoli 内保持单拷贝或低拷贝。BAC 克隆的 DNA 片段可以达到 1 Mb（平均约 200kb）。加上 F 因子遗传稳定，并且无缺失、重组和嵌合现象，这种能携带大段插入片段的能力使得使用 BAC 构建基因文库成为可能。大片段 DNA 转基因

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转基因小鼠制备实验

转基因小鼠制备实验可应用于：（1）动物发育研究；（2）研究细胞功能调控机制。

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胚胎移植-细菌人工染色体转基因动物技术

个 BAC 文库，如「CHORI29 clones m38」。点击 CHORI29 clones m38 前面的方格，选择」Labels.」按窗口右上角的「V」图形符号（表示 Save and close），页面刷新后，BACs 会在」Region indetail．」下面列出，可发现「CH29-488C17」「CH29-70J21」。（8）通常选择 2～3 个 BAC 克隆用于转基因研究。理论上，所得的 BAC 中应尽可能多地包含所需目的基因的 5＇和 3＇端序列。这可以增加基因的内源性表达。 2．

操作方法所属实验：细菌人工染色体转基因动物技术

转基因植物的分析

一、PCR 分析1. 当植株长到合适大小时（即 3 ~4 张叶片），取约 2 cm 长的叶片，立即放于液氮中，抽提基因组 DNA。2. 在液氮中将叶片磨成粉末状，并使用 Wizard 基因组 DNA 纯化试剂盒提取基因组 DNA。3. 为了确定是否为转基因植株，利用 bar 基因引物 1 和引物 2 对 DNA 做 PCR 分析，退火温度为 57℃。4. 将 PCR 阳性植株移栽到直径为 13 cm 的塑料盆中，并继续在转基因封闭温室中生长。二、除草剂叶片涂抹检测1. 用 0.1% 吐温将除草

操作方法所属实验：转基因植株的选择实验

问野生型能不能像转基因小鼠一样繁育？

莘橙

建议一起买一下野生型的，虽然国内也有很多很好的野生鼠，一起买的话，可以更好的确定基因背景是一致的，而且繁育与转基因小鼠一样。

实验问答2 回答4175 围观

问请问构建基因后进行鉴定，如何通过打转基因果蝇进行鉴定验证？怎么判断没有得到相应的转基因果蝇？为什么会没有呢？

loveliufudan

首先，可以通过PCR扩增和测序来检测果蝇基因组中是否存在转基因序列。在PCR反应中，利用一对引物特异性地扩增目标转基因序列。如果扩增出来了，就说明果蝇基因组中含有该转基因。此外，可以利用Southern blot等分子生物学技术进一步验证转基因果蝇的鉴定结果。其次，生物学表型鉴定方法也是常用的鉴定转基因果蝇的方法之一。由于转基因果蝇通常会表现出一些不同于野生型果蝇的生物学特征，如体型、行为、生长发育等方面的差异，因此可以通过这些生物学特征来判断果蝇是否为转基因。例如，如果转基因果蝇表现出比野生

实验问答2 回答588 围观

转基因动物技术(一)

转基因动物自1980--1981年产生后，迅速发展。它克服了物种之间的生殖隔离，实现了动物物种之间遗传物质的交换和重组，这不仅为遗传物质的研究提供了新的手段，丰富了物种的基因库，也扩大了生命科学的视野，由于转基因动物技术具有分子及细胞水平操作、整体表达的特点，使得人们能从更完整的系统中去认识生物分子的作用，现已广泛应用于医药、农业及生物学领域。在医学领域己用于遗传病、肿瘤、心血管疾病、免疫性疾病的研究，包括建立疾病的病理模型，探讨其病因、发病机理和基因治疗方法，研究基因表达调控以及进行药物

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转基因动物技术

嵌合体动物（chimera mosaic animal）。这类动物只有当外源基因整合入的“部分组织细胞”恰为生殖细胞时，才能将其携带的外源基因遗传给子代，一般用胚胎干细胞法或逆转录病毒载体法制备的第一代转基因动物均为嵌合体动物，而显微注射法得到的第一代转基因动物中，也有20％为嵌合体动物。 转基因动物　　动物所有细胞均整合有外源基因，则具有将外源基因遗传给子代的能力，通常被称为转基因动物。　　转基因动物技术是常规分子生物学技术的延伸和拓展，它不仅为人

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转基因植株的选择实验

外源基因整合到宿主细胞的概率低且随机发生，加之这些极少的转基因细胞很难再生获得完整植株，因此，转基因试验中利用选择标记基因已成为常态。对于那些不用于田间栽培的转基因研究而言，通常选用高抗除草剂或抗生素的选择标记。本实验来源「麦类作物转基因技术与田间鉴定实验指南」〔英〕H.D.琼斯 P.R .休里主编。

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人源化抗体转基因小鼠模型

人源化抗体转基因小鼠模型，英文名是Transgenic mice models of production of humanized antibody。目前，用于人源化抗体转基因小鼠模型的方法主要有1种：人源化抗体转基因小鼠模型。

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转基因植株的生长和选择

玉米素，并在持续的光照条件下培养。对农杆菌处理过的培养物，还要加入 160 mg/L 特美汀。可在这一阶段加入选择剂草铵膦 2~6 mg/L。3. 3 或 4 周后评价再生/选择反应。再生的愈伤组织转移至添加了 5 mg/L 玉米素和 2~6 mg/L 选择剂草铵膦的第二轮再生培养基上继续培养 3~4 周。将一半非转基因对照的愈伤组织置于添加有选择剂的再生培养基上培养，另一半则在无选择剂的再生培养基上培养，分别作为选择对照和非选择对照。4. 3 或 4 周后评价再生反应和选择反应。5. 为确保

操作方法所属实验：转基因植株的选择实验

转基因小鼠制备实验

遗传的基本物质是DNA，基因是位于染色体上有遗传效应的DNA片段，对于储存在生物全套染色体中的全部遗传信息，可称其为基因组。不同种类、不同个体的生物基因组成是不同的，对动物个体来说，非自身的基因成分属于外源基因，如果把外源基因整合或导入动物染色体基因中，这个外源基因就被称为转基因(transgene)(即转移来的基因)，这种动物就是转基因动物。

操作方法所属实验：转基因小鼠制备实验

问求助论文中转基因小鼠表述的意思

Eason老歌迷

转基因鼠是除了固有的基因组外，小鼠体内还有一个或以上外来转入基因，它能表达和体现转入基因的功能，实现特定目的。转基因是用DNA重组技术克隆的基因，通过一定的方式导入细胞或个体。通过转基因可对特定基因进行表达、修饰或删除。

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问转基因植物组培中aada是什么抗生素？

Dr_劉医生

aadA是外源性链霉素抗性基因，

实验问答3 回答3247 围观

转基因动物技术(三)

转基因动物自1980--1983年产生后，迅速发展。它克服了物种之间的生殖隔离，实现了动物物种之间遗传物质的交换和重组，这不仅为遗传物质的研究提供了新的手段，丰富了物种的基因库，也扩大了生命科学的视野，由于转基因动物技术具有分子及细胞水平操作、整体表达的特点，使得人们能从更完整的系统中去认识生物分子的作用，现已广泛应用于医药、农业及生物学领域。在医学领域己用于遗传病、肿瘤、心血管疾病、免疫性疾病的研究，包括建立疾病的病理模型，探讨其病因、发病机理和基因治疗方法，研究基因表达调控以及进行药物

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转基因动物技术(二)

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转基因作物田间试验的设计与管理实验

随着转基因技术体系的发展，异源基因转入植物基因组已成为可能，这为植物育种家拓展遗传资源提供了一条新途径。转基因作物田间试验的设计与管理因目的不同而异。育种家分析转基因作物的基因型和表现型的稳定性，记录田间条件转基因纯合个体数的变化。本实验来源「麦类作物转基因技术与田间鉴定实验指南」〔英〕H.D.琼斯 P.R .休里主编。

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双重 PCR- 毛细管电泳法检测大豆转基因

双重PCR-毛细管电泳法检测大豆转基因可应用于快速检测抗草甘膦转基因大豆。

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转基因植株的鉴定及种子的收获

1. 经第二轮选择后，挑出根茎生长良好的再生苗（见注 16 ) 移栽于土壤中。首先，将各株再生苗移入 8 cm2 的盆钵里生长 1~2 周，使它们能够逐渐适应温室条件。当小苗足够大时，再取叶片提取 DNA 用于 PCR 和 Southern 杂交分析（见注 17 ) 。2. 对于冬性小麦品种，装有待定的转基因植株的 Magenta 盒应置于春化室（条件见 2.1 节），6~8 周后，再采用上述相同的方法移栽入土壤中。3. 已确定的转基因苗应分单株移入直径 13 cm 的盆钵中种植，直至成熟

操作方法所属实验：农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验

转基因作物田间试验的设计与管理

机的犁刀上，使小区试验难以实现精确。小面积的转基因试验不应该在以前做常规试验的小区试验田上进行。3.2.2 施肥肥料应按常规耕种和生产要求施用。化肥用量多少需考虑转基因植株的株高，由于高秆的转基因植株容易倒伏，氮肥的施用量应比正常的用量略少。小面积田间试验不应施用有机肥，以免造成土壤养分的不均匀。3.2.3 土壤消毒这项措施仅限于可能有病虫草害危害时，并且只有当这种处理不会对试验目的有影响时才能使用。3.2.4 试验的设计与准备开展试验的第一步是制订试验方案，确定待测试的基因型及其在试验设计中的布局

操作方法所属实验：转基因作物田间试验的设计与管理实验