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PCR 实验基础原理
专题73 内容  1670 订阅
cDNA 合成技术
通过体外无细胞系统翻译找出目的基因mRNA以后,变可进行cDNA第一链的合成,其步骤如本文所介绍.
实验概况收录 1 操作方法 · 1 相关问答 · 3 相关文章
合成 5' 加帽转录物
一些 RNA 转录物要求其 5'末端有 m7 G(5')Ppp(5')G 帽子,它们在无细胞抽提物或在非洲爪蟾卵母细胞中才具有较高的翻译效率。也有报道表明具有甲基化帽子的转录物在体外剪切时具有较高的效率,并对核抽提物中的核酸酶具有更大的抗性
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
cDNA 合成实验
一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂0.1mol/L 二硫苏糖醇dNTP(每种 2.5 mmol/L)随机引物(20~40U/ml)(1034731,RocheAppliedScience,Indianapolis,IN)来自方案 4 的 RNA 样品RNasin(Promega)5X 反转录缓冲液主要反应组分混合物(X 样品管数)5X 反转录缓冲液                        10uldNTP(2.5 mmol)                          5ul 
操作方法所属实验:cDNA 合成实验
cDNA合成技术
cDNA第一链的合成:1.在Ependorf管中加50pmol/L的一种α32PdNTP和1mg/ml的mRNA 10μl(10μg),100m mol/L甲基氢氧化汞1μl,室温反应l0分钟,使RNA变性.2.加100m mol/l的β-巯基乙醇2μl和10m mol/l RNase抑制剂2μl,室温放置5分钟.β-巯基乙醇有稳定逆转录酶活性的作用.3.向上述反应混合物加lmg/ml的引物01igo dT(12~18聚体)10μl,1mol/l Tris.HCl(pH8.3)5μl,11
操作方法所属实验:cDNA 合成技术
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化能合成chemosynthesis

[1]指靠氧化无机物获得的能量来还原 CO2 所进行的合成。进行化能合成的生物仅限于一部分细菌,这些细菌都能进行无机营养(自养),进一步还可分为仅在无机培养基与二氧化碳存在下能生长的特异性的自养型细菌( Obligate antotroph)和也能进行有机营养(异养)的兼性自养型细菌( facultativeautotroph)。对于无机物的氧化,在许多情况下需要分子态氧,这时放出的能量是因被氧化物的种类而异,但固定二氧化碳的效率与被氧化物的种类无关。对于主要元素每一嗽佑卫氲哪艽笾氯

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合成橡胶

橡胶分天然橡胶和合成橡胶。天然橡胶来自热带和亚热带的橡胶树。由于橡胶在工业、农业、国防领域中有重要作用,因此它是重要的战略物资,这促使缺乏橡胶资源的国家率先研究开发合成橡胶。 通过对天然橡胶的化学成分进行剖析,发现它的基本组成是异戊二烯。于是启发人们用异戊二烯作为单体进行聚合反应,得到了合成橡胶,称为异戊橡胶。异戊橡胶的结构与性能基本上与天然橡胶相同。由于当时异戊二烯只能从松节油中获得,原料来源受到限制,而丁二烯则来源丰富,因此以丁二烯为基础开发了一系列合成

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RNA 大量转录合成
RNA 标准转录体系的一般回收率为 lugRNA/ug 质粒 DNA, 使用下面的方法,可以提高回收率至 5〜l0ug RNA/ug 质粒 DNA。大量制备 RNA 可以用于体外翻译。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
基因合成实验
基因合成可应用于:(1)代谢通路合成;(2)基因网络构建;(3)疫苗设计。
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合成 5'加帽转录物
一材料与设备1)DEPC:处理的水2) 转录缓冲液(5X):200 mmol/LTris-HCI(pH7.9),30 mmol/LMgCl2,lOmmol/L. 亚精胺,50 mmol/LNaCl3)lOOmmol/LDTT4)RNasin5)rATP,rCTP,rUTP,各 2.5 mmol/L6)rGTP0.5 mmol/L7)m7 G(5')ppp(5')G,5 mmol/L8)DNA 模板,1〜2 mg/ml9)RNA 样品缓冲液:10 mmoL/I. 去离子甲酰胺,3.5 ml37
操作方法所属实验:合成 5' 加帽转录物
RNA 大量转录合成
一材料与设备1) 模板 DNA 或质粒2)TE3)TE 饱和酚:氯仿4) 氯仿:异内醇 (24:1)5)3mol/LNaAc(pH5.2)6) 无水乙醇7)5X 转录缓冲液:200 mmol/LTris-HCl(pH7.9),30 mmol/LMgCl2,10 mmol/L 亚精胺,50 mmol/LNaCl8)lOOmmoL/LDTT9)RNasin10)rATP,rGTP,rUTP,rCTP,各 2.5 mmoI/L11)SF6,T3 或 T7RNA 聚合酶12)TE-饱和的酚:氯仿
操作方法所属实验:RNA 大量转录合成
Eason老歌迷
可以的,它也是属于原料的一种,
实验问答1 回答384 围观
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卟啉合成 porphyrin synthesis

   生物体内卟啉核是由甘氨酸和琥珀酰 CoA合成的。这里生成的δ -氨基 -γ -乙酰丙酸二分子缩合变成胆色素原,再由 4分子胆色素原生成具有卟啉核的尿卟啉原Ⅲ。此物后来经粪卟啉原Ⅲ变成原卟啉Ⅸ,在这里分出了血红素合成系统和叶绿素合成系统.发生了分叉.    

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植物microRNAs合成过程

相关专题 解读miRNA (MicroRNA) MicroRNA s (miRNAs) constitute a large group of endogenous single stranded small RNAs (19-24 nucleotides) having negative regulatory function on gene expression. They are processed

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单链 cDNA 的合成实验
本方案利用的是总RNA,因为如果使用18SrRNA作内对照,在后续实验中就不能使用带poly(A)的RNA。并且必须用DNA酶处理RNA,以去除所有污染的基因组DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。
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蛋白质合成实验
比色法可测定在任何一个时间点上的总蛋白量。在一定时期内连续观察可以用来测 定净蛋白质的累积或丟失(也就是合成的蛋白质—降解的蛋白质)。此时蛋白质合成 可以用放射标的氨基酸与细胞孵育来进行液闪测定,诸如 3H -亮氨酸或 35S-甲硫氨酸,所测定的是掺入到 106 个细胞或是某一段时间内每克蛋白质中的放射活性。来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
基因合成实验
基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术,与寡核苷酸合成有所不同:寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。基因合成是用人工方法合成基因的技术,是基因获取的手段之一,相对于从已有生物中获取基因来说,基因合成无需模板,因而不受基因来源限制。
操作方法所属实验:基因合成实验
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