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血液中蛋白质组学如何确定要提取膜蛋白或线粒体蛋白呢?

相关实验:实质等同性(蛋白质组学)实验

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dxy_g83xtsle

我想测人血液中与睡眠相关的靶向蛋白质组学,前期文献调研已经确认一些蛋白质需要测的,现在有三个问题:1.用血清还是血浆?要不要去除高丰度蛋白?2.血样的用量是多少?3.(最重要‼️)目标蛋白如何提取呢?也就是如何确定是膜蛋白或者线粒体蛋白或者是特地在某种细胞的蛋白呢?(老师让我确定提取目标,这样可以更精确的提取目标蛋白)

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3 个回答

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dxyc42u

有帮助

用血清比较好一些,血清提的蛋白更加纯一些

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loveliufudan

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1. 血清和血浆都可以用于蛋白质组学研究,具体选择取决于您的实验设计和研究目的。血浆是血液中不含血细胞的液体部分,而血清是血液在凝固后去除凝块和凝块细胞得到的液体部分。血浆中含有更多的蛋白质,包括高丰度蛋白,而血清则相对较少。如果您对高丰度蛋白质不感兴趣,可以选择使用血清,而如果您希望全面覆盖血液中的蛋白质组,可以使用血浆。

2. 血样的用量应根据实验要求和蛋白质组学分析方法进行确定。通常情况下,用于蛋白质组学分析的血样量较小,一般在数微升至几毫升之间。具体的用量取决于您所选择的分析平台的要求,如质谱仪器、酶联免疫吸附测定等。

3. 目标蛋白的提取方法取决于您所关注的特定细胞亚组分或细胞器。蛋白质组学研究通常涉及细胞裂解和蛋白质分离纯化的步骤。如果您希望提取膜蛋白或线粒体蛋白,您可以使用相应的细胞裂解方法,如亚细胞分离、膜蛋白富集等。对于特定细胞类型的蛋白提取,您可以使用细胞分选技术(如细胞排序)或使用特异性标记的抗体来富集目标细胞的蛋白质。


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毛利小五郎的徒弟

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建议用血浆,把高丰度蛋白去除一下

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