dxy_gawu3mo4
一段基因,连到pgex-4t-3载体上,用pgex-3’和r引物测序,测序结果比对,总是在基因和切开的载体连接处的5’端出问题,碱基增添或丢失,求助原因以及解决办法
bamboopiggy
1 看一下是否是引物合成问题 2,是否酶切位点不单一 3,直接看一下测序的峰图,是否是单一峰
loveliufudan
有几种可能的原因:
1.克隆效率不高,在基因和载体的接合处出现错误。
2.克隆过程中的突变,或基因的多态性导致错误。
3.PCR扩增时出现错误。
为了解决这个问题,您可以尝试以下方法:
1.重新测序多个样本,确保结果的一致性。
2.增加克隆效率,例如使用更高效的酶和载体。
3.核酸质量控制,使用高质量的样本进行测序。
最后,您可以考虑在其他实验室或专业机构进行确认,以确保结果的可靠性。
毛利小五郎的徒弟
因为碱基开头部位连接不紧密,所以突变率高
dxy_gawu3mo4
谢谢回答,想再问问,该如何调整呢