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求助为什么碱基总是在开头部分突变

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dxy_gawu3mo4

一段基因,连到pgex-4t-3载体上,用pgex-3’和r引物测序,测序结果比对,总是在基因和切开的载体连接处的5’端出问题,碱基增添或丢失,求助原因以及解决办法

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3 个回答

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bamboopiggy

有帮助

1 看一下是否是引物合成问题 2,是否酶切位点不单一 3,直接看一下测序的峰图,是否是单一峰

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loveliufudan

有帮助

有几种可能的原因:

1.克隆效率不高,在基因和载体的接合处出现错误。

2.克隆过程中的突变,或基因的多态性导致错误。

3.PCR扩增时出现错误。

为了解决这个问题,您可以尝试以下方法:

1.重新测序多个样本,确保结果的一致性。

2.增加克隆效率,例如使用更高效的酶和载体。

3.核酸质量控制,使用高质量的样本进行测序。

最后,您可以考虑在其他实验室或专业机构进行确认,以确保结果的可靠性。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

因为碱基开头部位连接不紧密,所以突变率高

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dxy_gawu3mo4user-title

谢谢回答,想再问问,该如何调整呢

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