做ChIP试验,必须做甲醛固定么?

不一定，视样品及试验方案而定，做甲醛固定的为X-Chip，而不需要固定的为N-Chip，甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质，蛋白质- DNA，蛋白质- RNA交联，形成生物复合体，防止细胞内组分的重新分布，甲醛的交联反应是完全可逆的，便于在后续步骤中对DNA和蛋白质进行分析，甲醛的交联反应可被加入的甘氨酸终止。

不一定，有几种其他固定剂在某些实验中效果很好，但甲醛是最常用的，因为它可以将距离较近的DNA和蛋白共价连接在一起。当然，对于一些距离较远的分子，可以使用其他固定剂，如DSG。在设计ChIP实验时，这些都是需要考虑的因素，但在大多数情况下，甲醛是固定样本的良好选择

很多实验室常用的37%甲醛其实并不适合用于ChIP实验固定细胞和组织。 首先37%甲醛溶液含有甲醇：甲醇起到稳定剂的作用，可以防止氧化和甲醛缩聚，但是甲醇存在的情况下，更容易有较大分子量的染色质产生，而这些染色质不容易被打断。

甲醇的加入会导致细胞渗透性增加，导致更多的甲醛进入细胞。如果不加入甲醇。甲醛不是很稳定并且容易聚合，会降低固定效率。

不一定，视样品及试验方案而定。做甲醛固定的为X-ChIP，而不需要固定的为N-ChIP。甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质，蛋白质-DNA，蛋白质-RNA交联，形成生物复合体，防止细胞内组分的重新分布。甲醛的交联反应是完全可逆的，便于在后续步骤中对DNA和蛋白质进行分析。甲醛的交联反应可被加入的甘氨酸终止。