偶联的兔源二抗单染在GFP通道下会有黄色荧光是为什么？在荧光双染时，如何避免或设计对照以排除荧光二抗串色带来的假阳性

买牌子好一点的抗体就能避免这种情况

二抗假阳线建议：

使用F(ab’)2形式的二抗可以避免其与活细胞中的Fc受体非特异性结合，还可避免与Protein A、ProteinG的非特异性结合，从而提高实验准确性。减少假阳性

因为涉及到产品的具体信息，建议先咨询试剂厂家的技术。针对荧光双染，建议只加二抗进行单独染色，观察结果，帮忙判断是否假阳性。做2个蛋白双染时，也建议每个蛋白单独成像观察，初步判定了实际结果后，再进行双染。以此帮助判定双染信号的真实情况。