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做了好几次都差不多是这个结果,我想问问有没有知道这是为啥啊?这次有两个诱导后颜色又加深了一点,应该不代表表达了吧?还有不知道为什么背景很难脱干净,脱色液都换了三个配方了还是不太行,是因为我制的胶不太行导致的吗?图一加深的两条是诱导后的,可是图二就是诱导前后都有深有浅
土井挞克树
配胶的溶液有问题,需要重配,并过滤,染色液配制时也要过滤把未融的R250去除。
loveliufudan
有几个可能的原因:
1. 蛋白质表达水平较低:如果蛋白质表达水平较低,那么在SDS染色中可能只能观察到非常弱的带,因此差异不明显。您可以尝试增加蛋白负载量或者进行更敏感的检测方法来增强信号。
2. 蛋白质在脱色过程中不完全:脱色过程可能会导致蛋白质带的淡化或消失,特别是对于低表达水平的蛋白质。您可以尝试优化脱色液的配方、时间和温度,以确保蛋白质可以完全被脱色。
3. 背景难以脱色干净:背景可能是由于胶本身的制备问题、试剂质量或操作步骤不当导致的。您可以检查胶的制备过程,确保所有步骤都符合标准化的操作,并尽可能使用高质量的试剂。另外,也可以尝试不同的背景脱色方法或增加背景脱色的时间。
总体来说,如果您多次重复实验得到类似的结果,那么可能需要仔细检查实验流程中的每个步骤,包括蛋白负载量、脱色液配方、胶的制备等,并进行适当的优化。
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