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样品准备的基本原则
1、代表性和一致性原则,2、迅速性原则,3、低温原则。
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标本一般要求起码需要1×107个细胞,离⼼后收集,置于-80摄⽒度环境中。
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对于标本的要求通常为:
标本的固定和处理:标本需要经过适当的固定和处理,以保持其形态和蛋白质表达的稳定性。不同的标本类型和实验目的需要采用不同的固定和处理方法。
标本的制备:标本需要进行切片,并在切片表面形成单层分子膜,以便进行蛋白质检测。切片的厚度通常在10-50微米之间。
标本的抗体染色:在数字化空间蛋白质组检测之前,通常需要进行抗体染色。抗体可以是一种特定的单克隆或多克隆抗体,用于检测所需的目标蛋白质。
不同的实验目的和检测方法需要使用不同的抗体,因此需要根据实验设计选择适当的抗体。通常,抗体染色可以在数字化空间蛋白质组检测之前进行,也可以在数字化空间蛋白质组检测之后进行。在数字化空间蛋白质组检测之前进行抗体染色可以提高信噪比和检测效率,但需要谨慎控制染色条件,以避免染色影响蛋白质结构和分布。
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